?技術(shù)原理:
產(chǎn)品僅用于科研DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。
產(chǎn)品名稱:油菜內(nèi)標準HMG I/Y 基因PCR試劑盒
運輸:低溫
保存:負20度
有效期:一年
貨期:2-3周
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注意事項:
1.基礎程序;
2.擴增溫度和延伸溫度;
3.反應時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應動力學;
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應體系與反應條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
儲存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
塔賓曲霉 種屬:Aspergillustubingensis(Schober)Mosseray 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 以廢糖蜜為原料檸檬酸。
海棗曲霉 種屬:Aspergillusphoenicis(Corda)Thom 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 糖蜜原料發(fā)酵檸檬酸。
米曲霉 種屬:Aspergillusoryzae(Ahlburg)Cohn 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 曲酸菌。
黑曲霉 種屬:AspergillusnigervanTieghem 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 抗菌素測定菌.
煙曲霉 種屬:AspergillusfumigatusFresenius 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 分解纖維素
臭曲霉 種屬:Aspergillusfoetidus(Nakazawas)ThometRaper 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 糖化酶產(chǎn)生菌。
泡盛曲霉 種屬:AspergillusawamoriNakazawa 安全等級 1模式菌株 no應用領(lǐng)域 產(chǎn)酸性蛋白酶。
褐紅小孔菌 種屬:Microporus affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 提供形式 斜面培養(yǎng)物模式菌株 no
擬莖點霉屬 種屬:Phomopsis theicola Curzi 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級 1模式菌株 no
暗色擬莖點霉 種屬:Diaporthe vaccinii Shear 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級 1模式菌株 no
葉下珠生擬莖點霉 種屬:Phomopsis phyllanthicola C.Q. Chang Z.D. Jiang & P.K. Chi 提供形式 斜面培養(yǎng)物模式菌株 no
灰黃青霉 種屬:Penicillium griseofulvum Dierckx 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級 1模式菌株 no
菜豆間座殼 種屬:Diaporthe phaseolorum var. phaseolorum (Cooke & Ellis) Sacc. 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級 1模式菌株 no
毛豆炭疽病菌 種屬:Colletotrichum boninense Moriwaki Toy. Sato & Tsukib. 提供形式 斜面培養(yǎng)物模式菌株 no
油菜內(nèi)標準HMG I/Y 基因PCR試劑盒人膀胱基質(zhì)成纖維細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HBdSF cDNA
人前列腺上皮細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HPEpiC cDNA
人前列腺成纖維細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HPrF cDNA
人前列腺平滑肌細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HPSMC cDNA
人顱骨造骨細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HCO cDNA
人滑膜細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HS cDNA
人髓核細胞cDNA 現(xiàn)貨供應 英文名稱:HNPC cDNA
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