?技術(shù)原理:
產(chǎn)品僅用于科研DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品名稱:水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gos9基因PCR試劑盒?
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
?
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
鞘氨醇單胞菌 種屬:Sphingomonasazotifigens 分離基物 日本三島稻米廠安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Chryseomicrobiumimtechense 種屬:Chryseomicrobiumimtechense 分離基物 海水,孟加拉灣,印度安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Chryseomicrobiumamylolyticum 種屬:Chryseomicrobiumamylolyticum 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
Lysobacterruishenii 種屬:Lysobacterruishenii 分離基物 長(zhǎng)期被百菌清(殺蟲劑)污染的土壤,江蘇安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Lysobacterdaejeonensis 種屬:Lysobacterdaejeonensis 分離基物 溫室土壤,韓國(guó)大田市安全等級(jí) 1模式菌株 yes
蘑菇假單胞菌 種屬:Pseudomonasagarici 分離基物 雙孢蘑菇,新西蘭安全等級(jí) 1模式菌株 no
產(chǎn)堿假單胞菌 種屬:Pseudomonasalcaligenes 分離基物 游泳池水安全等級(jí) 1模式菌株 yes
泛菌 種屬:Pantoea sp. 描述 菌落淡黃色、圓形、表面光滑不透明(有一點(diǎn)熒光),邊緣整齊,0.7mm左右,革蘭氏陰性菌,細(xì)胞呈短桿狀,菌體大小約1.4×0.56~0.706 µm。媒介酶試驗(yàn)陽(yáng)性;氧化酶試驗(yàn)陰性;能發(fā)酵葡萄糖;能運(yùn)動(dòng);苯丙氨基酸脫氨酶試驗(yàn)陰性;明膠液化陰性;硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性;V-P試驗(yàn)陰性;吲哚試驗(yàn)陰性;在TSI上不產(chǎn)硫化氫,檸檬酸鹽利用陽(yáng)性;甲基紅試驗(yàn)陰性;糖醇類發(fā)酵:不能發(fā)酵D-果糖、D-半乳糖、蔗糖、甘露糖、D-山梨糖。 寄主名稱 人
氣微菌 種屬:Aeromicrobium sp. 描述 白色,表面光滑不透明,邊緣整齊,革蘭氏陽(yáng)性,短桿至球狀,不運(yùn)動(dòng),好氧。媒介酶強(qiáng)陽(yáng)性;氧化酶陰性;硝酸鹽還原陰性;MR試驗(yàn)陰性;V-P試驗(yàn)陰性;明膠液化試驗(yàn)陰性;7%氯化鈉不長(zhǎng);糖醇類發(fā)酵:發(fā)酵葡萄糖、D-半乳糖,不發(fā)酵蔗糖。 傳播途徑 媒介
芽孢桿菌 種屬:Bacillus sp. 描述 菌落奶酷色,表面粗糙有花紋,邊緣不整齊,革蘭氏陽(yáng)性菌,桿狀、芽孢中生、菌體成對(duì)或成鏈狀排列,運(yùn)動(dòng)、兼性厭氧。媒介酶陽(yáng)性;氧化酶陰性;硝酸鹽還原陽(yáng)性;檸檬酸鹽利用陰性;V-P試驗(yàn)弱陽(yáng)性;7%氯化鈉不長(zhǎng);明膠液化陽(yáng)性;不能發(fā)酵葡萄糖、D-果糖。傳播途徑 媒介
脂肪桿菌 種屬:Pigmentiphage sp. 描述 菌落灰白色,表面光滑半透明、邊緣整齊,革蘭氏陽(yáng)性菌,桿狀、圓端,運(yùn)動(dòng)、好氧。媒介酶陽(yáng)性;氧化酶陰性;硝酸鹽還原陽(yáng)性;V-P試驗(yàn)陰性;MR試驗(yàn)陰性;淀粉水解陰性;明膠液化陽(yáng)性;糖醇類發(fā)酵:不能發(fā)酵葡萄糖、肌醇、D-半乳糖、蔗糖、山梨醇。 傳播途徑 媒介
茄科雷爾氏菌 種屬:Ralstonia solanacearum 描述 大小范圍為1.13~1.66×0.57~0.76μm,有1~4根極鞭;在LB平板上,菌落為乳白色不規(guī)則形或近圓形;在TTC平板上,菌落為不規(guī)則形或近圓形,隆起,中間粉紅色四周白色。寄主名稱 沙姜致病對(duì)象 植物
葡萄球菌 種屬:Staphylococcus sp. 描述 孢子絲彎曲;不產(chǎn)H2S;不產(chǎn)類黑色素;明膠液化;纖維素上不生長(zhǎng);牛奶不凝固不胨化。
馬鏈球菌獸瘟亞種(馬鏈球菌動(dòng)物傳染病亞 .. 種屬:Streptococcus equi subsp. Zooepidemicus 描述 菌落圓形、凸起,表面光滑不透明,邊緣整齊。革蘭氏陽(yáng)性菌;厭氧能長(zhǎng),且比好氧長(zhǎng)得好;接觸酶陰性;氧化酶陰性;溶血試驗(yàn):β溶血;V—P試驗(yàn)陰性;明膠液化試驗(yàn)陰性;硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性;糖醇類發(fā)酵:不能發(fā)酵D-葡萄糖、D-甘露醇、乳糖、海藻糖、山梨醇、D-核糖;10℃、40℃均不長(zhǎng)。寄主名稱 馬致病對(duì)象 動(dòng)物
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gos9基因PCR試劑盒口蹄疫病毒,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克隆抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
小鼠抗聚組氨酸單克隆抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
小鼠抗表皮生長(zhǎng)因子抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-KCa3.1 (SK4) (extracellular)-ATTO-488 KCa3.1 (SK4) (胞外)-ATTO-488抗體(50 ug)
Anti-KCa3.1 (SK4) (extracellular) KCa3.1 (SK4) (胞外) 抗體(25 ug)
Anti-KCa3.1 (SK4) (extracellular) KCa3.1 (SK4) (胞外) 抗體(100 ug)
Anti-KCa2.3 (SK3) (N-term)-ATTO-594 KCa2.3 (SK3) (N-term)-ATTO-594抗體(50 ul)
Anti-KCa2.3 (N-term) KCa2.3 (N-term)抗體(50 ul)
Anti-KCa2.3 (N-term) KCa2.3 (N-term)抗體(25 ul)
Anti-KCa2.3 (N-term) KCa2.3 (N-term)抗體(0.2 ml)
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