注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:同人皰疹病毒型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱:Human Herpesvirus 4 (HHV4,EB) )4 PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
同人皰疹病毒型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
伽升沃C中文別名: 1,3,6,7-四羥基-8-(3-羥基-3-甲基丁基)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-口山-酮 英文名: Garcinone C 英文別名: 1,3,6,7-Tetrahydroxy-8-(3-hydroxy-3-methylbutyl)-2-(3-methyl-2-buten-1-yl)-9H-xanthen-9-one CAS登錄號(hào): 76996-27-5 分子式: C23H26O7
水飛薊汀中文別名: 水飛薊亭 英文名: Silicristin 英文別名: hydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(hydroxymethyl)-5-benzofuranyl]-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-,(2R,3R) CAS登錄號(hào): 33889-69-9 分子式: C25H22O10
水飛薊寧英文名: Silydianin 英文別名: 3R,8R)-2,3,3aβ,7a-Tetrahydro-7aβ-hydroxy-8-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-[(2R,3R)-3,5,7-trihydroxy-3,4-dihydro-4-oxo-2H-1-benzopyran-2-yl]-3α,6α-methanobenzofuran-7(6H)-one CAS登錄號(hào): 29782-68-1 分子式: C25H22O10 分子量: 482.44
異水飛薊賓英文名: Isosilybin 英文別名: -(2,3-Dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(hydroxymethyl)-1,4-benzodioxin-6-yl)-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-4H-1-benzopyran-4-one CAS登錄號(hào): 72581-71-6 分子式: C25H22O10 分子量: 482.44
刺囊酸英文名: Echinocystic acid 英文別名: (3beta,16alpha)-3,16-dihydroxyolean-12-en-28-oic acid CAS登錄號(hào): 510-30-5 分子式: C30H48O4 分子量: 472.7
杯莧甾酮英文名: Cyasterone 英文別名: (22R,24S,25S,28R)-2β,3β,14,20,22,28-Hexahydroxy-6-oxo(26-13C)-5β-stigmasta-7-ene-26-oic acid γ-lactone CAS登錄號(hào): 17086-76-9 分子式: C29H44O8 分子量: 520.65
原花青素B1中文別名: 原失車菊素B1 英文名: Proanthocyanidin B1 英文別名: 2R,2'R,3R,3'S,4β)-3,3',4,4'-Tetrahydro-2α,2'α-bis(3,4-dihydroxyphenyl)-4,8'-bi[2H-1-benzopyran]-3,3',5,5',7,7'-hexol CAS登錄號(hào): 20315-25-7 分子式: C30H26O12
蒙花苷中文別名: 蒙花甙 英文名: Buddleoside 英文別名: 7-[[6-O-(6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-beta-D-glucopyranosyl]oxy]-5-hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one CAS登錄號(hào): 480-36-4 分子式: C28H32O14
鹽酸去氫駱駝蓬堿中文別名: 鹽酸哈爾明堿 英文名: Harmine hydrochloride 英文別名: (3,4-b)indole,7-methoxy-1-methyl-9h-pyrido(monohydrochloride CAS登錄號(hào): 343-27-1 分子式: C13H13ClN2O
1-咖啡??鼘幩嵊⑽拿? Cyclohexanecarboxylicacid 英文別名: 1-[[3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propen-1-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxy-,(1a,3R,4a,5R) CAS登錄號(hào): 1241-87-8 分子式: C16H18O9 分子量: 354.31
柴胡皂苷B中文別名: 柴胡皂甙B 英文名: Saikosaponin B CAS登錄號(hào): 新品待定分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
同人皰疹病毒型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格DL-丙氨酸乙酯鹽酸鹽,5g4-Ethylcyclohexanone 質(zhì)量規(guī)格:BR,魚(yú)鱗或魚(yú)皮提取
氨酸乙酯鹽酸鹽,100g4-N-PENTYLOXYBENZALDEHYDE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
氨酸乙酯鹽酸鹽,10g2-HYDROXY-6-METHYLPYRAZINE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
氨酸乙酯鹽酸鹽,25gUndecanoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分
L-精氨酸甲酯,100gFreund 's Adjuvant Incomplete 質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
L-精氨酸甲酯,25g2,6,6-Trimethyl-2-cyclohexene-1,4-dione 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
L-精氨酸甲酯,5gSolvent Red 23 質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%
L-酪氨酸叔丁酯,100g1,3,5-Trimethyl-2,4,6-tris(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxybenzyl)benzene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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