購買感覺態(tài)細胞客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

存

250mLAnticoagulant EDTA Solution（抗凝劑EDTA）Anticoagulant EDTA Solution常溫保存

250mLAntigen Retrieval Reagent，5XAntigen Retrieval Reagent，5X常溫保存

10gATP Solution（ATP溶液），100mMATP Solution，100mM常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.0 BES Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.5 BES Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.0  BES Buffer,0.5M,pH7.0  常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.4  BES Buffer,0.5M,pH7.4  常溫保存

500mLBES Buffered Saline,2X BES Buffered Saline,2X 常溫保存

50mLBeta Glycerophosphate Solution（beta-磷酸甘油溶液）,100mMBeta Glycerophosphate Solution,100mM常溫保存

250mLBeta-ME-EDTA Solution（beta-巰基乙醇-EDTA溶液） Beta-ME-EDTA Solution 常溫保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液），1M,pH8.5 Bicarbonate Buffer，1M,pH8.5 常溫保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液）,1M,pH9.0 Bicarbonate Buffer,1M,pH9.0 常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH7.4  Bicine Buffer，0.5M,pH7.4  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.0  Bicine Buffer，0.5M,pH8.0  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.5  Bicine Buffer，0.5M,pH8.5  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH9.0  Bicine Buffer，0.5M,pH9.0  常溫保存

100mLBiotin Solution（生物素溶液）,0.02%Biotin Solution,0.02%常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  常溫保存

黃曲霉PCR試劑盒

續(xù)斷苷B化學對照品HPLC≥95%20mg

感覺態(tài)細胞二氫大豆苷化學對照品HPLC≥95%20mg

氧化表小檗堿化學對照品HPLC≥95%20mg

寶藿苷V化學對照品HPLC≥98%20mg

寶藿苷VII化學對照品HPLC≥98%20mg

槐黃醇化學對照品HPLC≥98%20mg

鴉膽子素 D化學對照品HPLC≥98%20mg去氫紫堇堿化學對照品HPLC≥98%20mg

1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯化學對照品HPLC≥98%20mg

丹參酮甲酯化學對照品HPLC≥98%20mg

20R-人參皂苷Rg2化學對照品HPLC≥98%20mg

三七素化學對照品HPLC≥98%20mg

齒孔酸; 齒孔菌酸化學對照品HPLC≥96.5%20mg

馬兜鈴內酰胺A化學對照品HPLC≥98%20mg

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。