植物ELISA試劑盒的原理：
樣品中的游離三聚氰胺與預(yù)包被在板子上的三聚氰胺蛋白偶聯(lián)物競爭結(jié)合酶標(biāo)記三聚氰胺抗體，通過洗滌洗掉未結(jié)合的酶標(biāo)記三聚氰胺抗體，再通過酶的專一性顯色劑顯色根據(jù)顯色的深淺來判斷樣品中三聚氰胺含量。根據(jù)競爭性原理，如果樣品中的游離三聚氰胺量少，則酶標(biāo)記的三聚氰胺抗體與包被在板子上的三聚氰胺偶聯(lián)物結(jié)合的多，顯色深，反之，則顯色淺。檢測時設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線測定樣品中三聚氰胺的含量。
植物ELISA試劑盒的實驗操作步驟如下：
1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可在小試管中進(jìn)行稀釋。
2、加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9、顯色：每孔先加入顯色劑，再加入顯色劑，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10、終止：每孔加終止液，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11。、測定：以空白空調(diào)零，依序測量各孔的吸光度（OD值），測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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